我们首先使用3-（4，5-二甲基-2-噻唑基）-2，5-二苯基-2H-四唑溴化物（MTT）测定法评估了法匹拉韦或利巴韦林的细胞毒性作用。将细胞活力与载体处理（DMSO）对照进行比较。法匹拉韦和利巴韦林在所有三种细胞类型中浓度为100μM或更低时均不影响细胞活力。
法匹拉韦（Favipiravir）和利巴韦林抑制Vero细胞中的ZIKV感染
然后，我们评估了ZIKV在HDF和A549细胞中的复制动力学。细胞在MOI为1时感染ZIKV（非洲MR766株），并通过qRT-PCR测量ZIKV包膜（E）和非结构蛋白5（NS5）基因表达。我们证明HDF和A549细胞都高度易感染ZIKV感染接下来，我们研究了法匹拉韦和利巴韦林治疗对ZIKV基因表达的影响。细胞感染ZIKV，并用不同浓度的法匹拉韦或利巴韦林处理24小时。法匹拉韦治疗以剂量依赖性方式显着抑制ZIKV复制。浓度为25μM的法匹拉韦处理导致HDF中ZIKVE和NS5转录本的表达降低75%>，而 A549 细胞中需要 50 μM 法匹拉韦才能分别降低 67% 和 26% 的 ZIKVE和NS5表达. 利巴韦林也导致ZIKV基因表达的显着抑制。
接下来，我们使用共聚焦显微镜测量了A549细胞中ZIKV E蛋白的表达。细胞感染ZIKV，并用不同浓度的法匹拉韦或利巴韦林处理72小时。免疫荧光染色证实了qRT-PCR结果由于法匹拉韦或利巴韦林治疗降低ZIKV E蛋白.我们进一步分析了法匹拉韦和利巴韦林对Vero细胞ZIKV感染的影响。使用ZIKV感染的Vero细胞培养上清液上的斑块测定法测定病毒复制。法匹拉韦或利巴韦林处理的细胞中的斑块数量以剂量依赖性方式显着减少.综上所述，这些结果表明，法匹拉韦或利巴韦林治疗可显着降低ZIKV特异性E和NS5基因，E蛋白的表达以及传染性病毒颗粒的产生。此外，我们的数据还表明，利巴韦林对ZIKV复制的抑制能力优于法匹拉韦。
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