劳拉替尼对ROS1WT表达细胞的优越性

　　为了研究ROS1突变对ROS1对TKIs敏感性的影响，我们生成了表达EZR-ROS1WT和F3细胞。用递增浓度的克唑替尼，赛立替尼和劳拉替尼处理细胞。生存力分析的结果证实，与克唑替尼和塞立替尼相比。后者在抑制ROS1WT方面表现出相似的IC50值，而塞立替尼与克唑替尼相比对天然ALK形式具有明显的生物学优势。正如与ALK的结构相似性所暗示的那样，ROS1激酶结构域中的S1986FY取代导致克唑替尼和赛立替尼耐药。但是，劳拉替尼仍保持对S1986F和S1986Y突变的强烈抑制活性。

　　第一个也是最报道的ROS1G2032R突变对这三种化合物产生抗药性。对ROS1的免疫印迹分析和下游途径的激活证实了细胞存活率的测定。与克唑替尼和塞立替尼相比，需要较低剂量的劳拉替尼以降低ROS1的磷酸化，而仅高浓度的劳拉替尼似乎对ROS1G2032R的磷酸化具有轻度的作用。克唑替尼和塞立替尼对具有S1986F / Y突变的细胞中的ROS1磷酸化仅具有轻微的作用，从而导致持续的S6磷酸化和细胞存活。只有劳拉替尼能够完全关闭ROS1，AKT和ERK信号转导，从而在存在S1986Y或S1986F突变的情况下抑制S6磷酸化。总的来说，这些体外结果显示ROS1赋予了克唑替尼和色瑞替尼耐药S1986F / Y突变，劳拉替尼保持其抑制能力。

　　我们还进行了涉及蛋白抑制剂复合物的构象研究。由于存在有关突变位点的复杂性的内在限制，正如相应的ALK C1156Y替代已经报道的那样，S1986Y 突变阻止了克唑替尼进入激酶结构域，而劳拉替尼可以固定并维持其诱导构象转变的能力。既有野生型也有突变的ROS1形式。在克唑替尼结合的情况下，alphaC螺旋的富含甘氨酸的环末端的位置是由内而外的，而在氯雷替尼相互作用的情况下确实相反，这可能解释了在抑制ROS1突变体方面的差异能力类似地，1981Tins，L1982F，S1986Y / F，F2004C / V和D2033N ROS1突变将对赛立替尼耐药并且对氯雷替尼敏感。

　　由于2001年的M2001T，关守L2026M和G2101A ROS1突变仍然容易受到赛立替尼的抑制。较小的尺寸允许进入ATP结合袋。值得注意的是，最近的证据证实了我们对赛立替尼缺乏针对D2033N和L1982F突变的活性的预测，因为我们在这里对S1986Y / F突变体和赛立替尼对L2026M关守突变的功效进行了功能验证。所述的ALK二级突变可在ROS1激酶结构域中获得。如对ALK L1152R突变所观察到的，由于单核苷酸碱基突变，精氨酸残基不能替代L1982ROS1密码子的亮氨酸。然而，在报道了在诱变筛选中赋予克唑替尼和赛立替尼耐药性的L1982F突变。

　　由于单核苷酸修饰，ROS1不能获得L1198F（对色瑞替尼和劳拉替尼的耐药性，克唑替尼重新敏化；和S1206Y ALK突变的同源物。同样，M2001ROS1密码子可以产生M2001T，但不能产生M2001S或M2001N（如ALK I1171密码子所报告的那样）。目前，人们越来越重视识别靶向治疗的耐药机制，更好地指导治疗策略，并对患者的预后产生有利影响。我们报告在ROS1激酶域中的两个新型突变能够赋予克唑替尼耐药性，但允许劳拉替尼疗效。使用表达天然或突变的EZR-ROS1的Ba / F3细胞，我们在功能上证明S1986F / Y替代赋予克唑替尼和侧岁替你耐药性。与克唑替尼和赛立替尼相比，劳拉替尼对WT ROS1的作用更强，可保持对ROS1S1986F / Y细胞的强烈生长抑制作用。免疫印迹分析证实，劳拉替尼是唯一经过测试的能够完全关闭工程化Ba / F3细胞中ROS1和下游信号磷酸化的ALK / ROS1 TKI。劳拉替尼一个月多少钱？在哪里购买？详情可咨询下方微信。