所有与动物有关的实验均按照机构实验动物伦理委员会的指导进行。昆明小鼠(18–20μg)从北京HFK生物科学有限公司(中国北京)获得。在实验过程中,所有小鼠均可自由进食正常饮食和水,但在给药前将小鼠禁食12h。制备校准标准品和质量控制(QC)样品将洛拉替尼溶解在甲醇中,获得1.0毫克/毫升的主要储备溶液,并在进一步分析之前保持在4℃。通过用甲醇稀释一次储备液至终浓度为100.0μg/ mL来制备工作标准溶液。
血清校准标准液的八种浓度分别为1,000、500、200、100、50、20、10和5μng/ mL。组织校准标准液的七个浓度分别为500、200、100、50、20、10和5 ng / mL。以与上述相同的方式产生血清和组织QC样品。四种血清QC样品浓度分别为800(QCH),100(QCM),10(QCL)和5(LLOQ)ng / mL。组织QC样品的四种浓度分别为400(QCH),100(QCM),10(QCL)和5(LLOQ)ng / mL。在进行进一步分析之前,将校准标样和质控样品保存在-20°C下。
为了使所有血清样品都落在适合检测的范围内,用空白血清将10μL的血清样品稀释至100μL。使用涡旋混合将稀释的血清样品均匀混合。通过将200μl的IS工作溶液(10μng/ mL)加入20μμL的稀释血清样品中来制备混合物样品,并将该混合物涡旋混合3min。为了提取劳拉替尼,通过离心(11,000 rpm,15 min,4℃)获得上清液。然后,用纯净水将100μL的上清液稀释至200μL,将混合物立即涡旋混合3分钟。
称量组织样品的重量,并以甲醇:组织= 2 mL∶100μmg的比例向组织样品中加入甲醇。随后,使用高通量组织均质器将组织样品均质化,并涡旋混合3分钟。上清液是通过在11,000 rpm下离心15分钟获得的。然后,将400μL40μng/ mL IS溶液添加到100μL上清液中。涡旋混合后,通过离心分离上清液。通过向空白小鼠血清中添加工作标准溶液并用甲醇提取空白组织匀浆来制备血清和组织校准标准液。被测试的组织包括骨骼肌,脂肪,大脑,心脏,肝脏,脾脏,肺,肾,胃,小肠和大肠。那么劳拉替尼一个月多少钱?劳拉替尼该怎么购买?如果您有需要可以联系下面的微信。
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