药物外排功能的直接抑制和药物转运蛋白的瞬时下调是调节剂使多药耐药癌细胞重新对化疗药物敏感的两种最常见方式。为此，厄达替尼（erdafitinib）对 ABCB1 介导的钙黄绿素（一种 ABCB1 底物钙黄绿素-AM 的荧光产物和 ABCG2 介导的脱镁磷 A (PhA) 外排的影响，即 ABCG2 的荧光底物, 在过表达 ABCB1 或 ABCG2 的细胞中确定。
1 μM 的 厄达替尼显着增加了 MDR19-HEK293 细胞中钙黄绿素的细胞内积累和 NCI-ADR-RES 细胞。相比之下，厄达替尼对 R482-HEK293 细胞中 PhA 的细胞内积累的影响很小。和 S1-M1-80 细胞。值得注意的是，3 μM 的 tariquidar 用作 ABCB1 的参考抑制剂，而 1 μM 的 Ko143 用作 ABCG2 的参考抑制剂。厄达替尼、tariquidar 和 Ko143 对亲代细胞系的细胞内药物积累没有显着影响。此外，厄达替尼在 MDR19-HEK293 细胞、NCI-ADR-RES 和 KB-V-1 细胞中以浓度依赖性方式抑制 ABCB1 介导的钙黄绿素流出。计算出的 IC50值分别约为 1.8 μM、3.6 μM 和 9.3 μM。
接下来，在过表达 ABCB1 的 NCI-ADR-RES 和 KB-V-1 癌细胞中检查了厄达替尼对 ABCB1 蛋白表达的潜在影响。如材料和方法中所述，用浓度增加的厄达替尼 (0.1-1.0 μM) 处理细胞 72 小时，然后进行免疫印迹。厄达替尼对 NCI-ADR-RES 或 KB-V-1 癌细胞系中 ABCB1 的蛋白表达没有显着影响。我们的数据表明，厄达替尼通过抑制 ABCB1 的药物转运功能而不是通过下调 ABCB1 过表达癌细胞系中的 ABCB1 蛋白来逆转多药耐药。
为了证实厄达替尼通过恢复细胞毒性药物在 ABCB1 过表达癌细胞中的细胞毒性而不是通过启动生长阻滞效应来逆转 ABCB1 介导的多药耐药性，研究了厄达替尼对 ABCB1 过表达癌细胞中药物诱导的细胞凋亡的影响。药物敏感的亲本 KB-3-1 和 ABCB1 过表达 KB-V-1 癌细胞用 0.5 μM 秋水仙碱处理，秋水仙碱是已知的 ABCB1 转运底物和已知的细胞凋亡诱导剂，在存在下或不存在 5 μM 厄达替尼48 小时，然后按照材料和方法中的详细说明进行处理。秋水仙碱显着诱导 KB-3-1 细胞的凋亡水平（从大约 7% 的基础水平到总细胞凋亡的 53%），但在 KB-V-1 细胞中没有（从大约 7% 的基础水平到 9%总细胞凋亡）。虽然单独用厄达替尼治疗不会在 KB-3-1 和 KB-V-1 细胞中诱导明显的细胞凋亡，但厄达替尼使秋水仙碱诱导的 KB-V-1 细胞凋亡从早期和早期的 9% 显着增加到 57%。晚期凋亡。更多详情可咨询下方微信。
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