首先大家要理解一个概念CAR-T是一种治疗方法,也是一种药。说到药的话,那就肯定有它的作用靶点。CAR-T的话作用靶点就是癌症细胞表面的抗原,现在最热门的靶点是CD19和CD20。Kymriah(诺华Novartis)这个全宇宙第一款FDA获批的CAR-T细胞治疗就是以CD19作为靶点的。所以我们CAR-T细胞的受体,就是抗-CD19受体,也就是能抓癌细胞表面CD19的受体。那怎么样才能让CAR-T细胞获得相应的受体?对!我们使用的就是DNA!
细胞治疗的基本概念在前两期已经有了一个概况给大家了。对于制备CAR-T 细胞来说,其实我们大可以把它分成两块。一块是病毒,一块是细胞。之前已经了解过,CAR-T细胞就是一种拥有人工受体的超强力T细胞,可以快速捕杀癌细胞。这里的病毒其实不是常常让我们生病的病原体,而是一种基因工程载体。打个比方来说,那就是一台卡车,把我们想要的“货物”运送到细胞里面。其次,病毒作为“卡车”,有着它的优势。因为它是寄生生命,所以它会天生有找宿主的特性,可以迅速找到我们需要改造的细胞。
在CAR-T的流程里,首先,我们采用的病毒是慢病毒。慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息,是慢病毒载体系统的主要组成部分。在生产研究上,首先,使用基因编辑技术把CAR-T人工受体DNA序列剪切黏贴到慢病毒载体上。而后常常会把慢病毒载体Lentivius vector以分子生物学方法导入到293T宿主细胞里面。在宿主细胞内,病毒载体会利用宿主体内的细胞功能生产复制出自己的RNA跟蛋白质外壳。合成后以萌芽的方式离开细胞。收集细胞培养液即可得到相应的改造后的慢病毒。
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