有了理论依据作基础，百时美施贵宝公司运用Ipilimumab（CTLA-4抑制剂，Yervoy）及Nivolumab（PD-1抑制剂，Opdivo）强强联手的作用，进行了Checkmate-067试验，结果果然惊人，1+1＞2。Checkmate-067研究入组了945名Ⅲ期或IV期黑色素瘤患者，之前未经过任何治疗且不能进行手术治疗。病人分为三组，一线用药剂量如下：
①联合用药组：前4个疗程是Opdivo（1mg/1kg）和Ipilimumab（3mg/kg）联合，3周打一次，然后每2周打一次单药Nivolumab维持治疗，剂量为3mg/kg。②PD-1单药组：每三周一次Nivolumab联合安慰剂，剂量为3mg/kg。③CTLA-4单药组：每三周一次Ipilimumab联合安慰剂，剂量为3mg/kg。注射4个疗程。
免疫联合组的4年总生存期OS率达到53%，中位OS未达到。具体数据：中位总生存期OS：联合组尚未达到 VS PD-1组36.9个月 VS CTLA-4组19.9个月。中位无进展生存期PFS：联合组11.5个月 VS PD-1组6.9个月 VS CTLA-4组2.9个月。有效率ORR：联合组58%（CR达21%，PR达30%） VS PD-1组45% VS CTLA-4组19%。不过，要留意的是联合治疗的≥3级AEs为59%，同样翻倍（另两组22%及28%）。鉴于副反应较大，新的临床研究一般设计为低剂量的CTLA-4抑制剂1mg/kg。
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