乐卫玛/仑伐替尼显示出对结直肠癌异种移植物的抗肿瘤活性

　　转移性结直肠癌 (CRC) 的临床预后仍未达到理想水平，需要新的药物。在这里，我们专注于多酪氨酸激酶抑制剂乐卫玛（仑伐替尼），并评估了其对体外人类 CRC 细胞系和体内人类 CRC 异种移植物的治疗效果。在 10 个人类 CRC 细胞系和人类内皮细胞 (HUVEC) 上检查了仑伐替尼对细胞活力的影响。在离体小鼠主动脉环血管生成试验中研究了仑伐替尼对 VEGF 诱导的血管生成的抑制作用。此外，在体内研究了仑伐替尼对源自 CRC 细胞系的异种移植物和具有突变的KRAS 的CRC 患者切除标本的功效.在体外观察到仑伐替尼对 CRC 细胞活力的细胞毒性作用相对较低。内皮细胞 (HUVEC) 对与仑伐替尼的孵育更敏感。这与仑伐替尼在三维离体小鼠主动脉环血管生成试验中显示出抗血管生成作用的观察结果一致。仑伐替尼在体外有效破坏了 CRC 细胞介导的 VEGF 刺激的 HUVEC生长。每天用仑伐替尼 (5 mg/kg)进行体内治疗显着延迟了KRAS的生长突变的 CRC 异种移植物具有降低的肿瘤相关血管形成密度并且没有肿瘤消退。这一观察结果与仑伐替尼没有显着减少 CRC 异种移植物中 Ki67 阳性细胞数量的结果一致。结果表明，在裸鼠耐受良好的剂量下，E7080 具有抗血管生成活性。E7080 可在治疗 KRAS 突变的 CRC 中提供治疗益处。

　　在这项研究中，我们表明，多激酶抑制剂，乐卫玛/仑伐替尼，有效地延迟人类CRC异种移植物的生长从两个HCT116和LS174T细胞（KRAS突变），分别与从初级切除标本具有突变的KRAS在裸鼠中。所提出的在体内和体外数据表明，仑伐替尼禁止显示毛细管发芽并抑制内皮细胞增殖。在三维离体小鼠主动脉环血管生成试验中也观察到了仑伐替尼的抗血管生成作用。此外，仑伐替尼体内疗法降低肿瘤相关血管形成的密度，导致 CRC 异种移植物中缺氧区域的增加。总之，这些数据表明，仑伐替尼干扰实体瘤生长的主要机制显然是抑制血管生成，这对于为肿瘤提供氧气和营养是必不可少的。

　　在本研究中，我们还表明乐卫玛/仑伐替尼在体外对人 CRC 细胞具有不同的细胞毒性作用。测试的 10 个 CRC 细胞系的 IC50值介于 120 μmol/l 和 > 1000 μmol/l 之间。需要强调的是，确定 IC50值的体外测定在很大程度上取决于许多因素，包括细胞活力、细胞增殖率、药物暴露时的细胞汇合度和用于确定细胞活力的方法（类型的测定）。这可以解释为什么某些肿瘤细胞系的IC50值可能不同。然而，通过这组 CRC 细胞系，我们证明仑伐替尼对体外 CRC 细胞活力的细胞毒性作用相对较低。此外，其他人也显示了仑伐替尼对此处描述的内皮细胞活力的直接影响。

　　通过血管生成诱导和维持肿瘤血管化的能力是癌症的标志，与晚期疾病和不良预后相关。实体瘤会经历长时间的无血管状态，在这种状态下，它们通过简单的被动扩散获得氧气和营养，直径可达 2 至 4 毫米。从这个大小开始，实体瘤的生长和存活需要通过血管生成和出生后血管生成进行血管化。新血管确保氧气和营养的供应。肿瘤细胞分泌多种生长因子，例如 VEGF，这是已知的主要促血管生成因子之一。VEGF 刺激内皮细胞的增殖和迁移，导致新血管的形成。在肿瘤细胞中，VEGF 信号独立于血管生成影响肿瘤功能。我们的数据显示，这里使用的细胞系产生 VEGF，其诱导包括 HUVEC 在内的人内皮细胞的生长。VEGF 诱导的 HUVEC 生长受到低剂量仑伐替尼 (0.1 μmol/l) 的抑制。CRC 细胞系对体外仑伐替尼处理和仑伐替尼浓度相对耐受，后者对 HUVEC 具有毒性 (IC50: 22 μmol/l)，不影响 CRC 细胞活力。用低剂量 E7080 (10 μmol/l) 处理的 HUVEC 通过阻断 VEGFR 介导的下游 MAPK 信号传导，显示出对细胞活力的显着抑制。在这方面，我们的结果与之前的报告一致。此外，我们的数据显示乐卫玛/仑伐替尼在 VEGF 刺激后显着减少了 HUVEC 中 MYC 上调。MYC 是一种螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链转录因子，是活性 MAPK 信号通路的主要下游靶标之一。VEGF 已被证明可诱导人内皮细胞中 MYC 的表达，而 MYC 的上调又被证明会导致细胞增殖。

　　总之，我们已经证明乐卫玛/仑伐替尼，一种多酪氨酸激酶抑制剂，以 5 mg/kg 的剂量抑制体内血管生成，并延迟具有KRAS突变的异种移植物的生长。这些发现表明乐卫玛/仑伐替尼具有治疗KRAS突变 CRC患者的治疗潜力，这些患者无法从西妥昔单抗的一线治疗中获益。此外，我们的研究结果表明，在未来的研究中需要将仑伐替尼与 FOLFOX 等化疗药物结合使用，以进一步提高其疗效。微信扫描下方二维码了解更多：