索拉非尼/索拉菲尼能抑制血管内皮细胞增殖

　　甲状腺未分化癌 (ATC) 是一种罕见的难治性疾病，常与BRAF突变和异常血管内皮生长因子 (VEGF) 分泌有关。评价了索拉非尼/索拉菲尼的抗肿瘤作用，并研究了其作用机制。使用了四种人类 ATC 细胞系：OCUT-4，它具有BRAF突变；OCUT-6 和 ACT-1，携带NRAS突变；和 OCUT-2，在BRAF和PI3KCA 中具有突变.通过 MTT 测定评估索拉非尼的生存力。为了检查索拉非尼对细胞内信号转导的抑制作用，通过蛋白质印迹检查丝裂原活化蛋白激酶激酶的表达。此外，使用流式细胞术进行细胞周期分析。检查了索拉非尼对用来自 ATC 细胞的条件培养基刺激的 ATC 细胞和人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 的生长的抑制作用。

　　索拉非尼/索拉菲尼比其他 ATC 细胞系更有效地抑制 OCUT-4 的活力；这些作用可能是通过抑制丝裂原活化蛋白激酶激酶磷酸化来抑制细胞生长的。相反，在具有NRAS 的OCUT-6 细胞中未观察到类似的抑制突变。四种细胞系分泌不同数量的 VEGF，并且 HUVEC 的增殖受到它们的条件培养基的不同刺激。抗 VEGF 抗体和索拉非尼都阻止了这种增殖刺激。总之，与由其上游基因RAS产生的信号相比，索拉非尼更有效地抑制了 ATC 细胞中RAF产生的生长信号。ATC 细胞通过体液因子（包括 VEGF）刺激 HUVEC 的生长；索拉非尼明显抑制了这种作用。目前的研究结果突出了索拉非尼治疗 ATC 的潜力，并提供了对其作用机制的深入了解。

　　索拉非尼/索拉菲尼是一种多激酶抑制剂，可削弱RAF家族基因产生的信号转导。索拉非尼还抑制 VEGFR-1、-2、-3、PDGFR-β、RET、c-Kit 和 Fms 样酪氨酸激酶 3 的酪氨酸激酶活性，并阻止启动下游信号。从理论上讲，根据使用各种癌细胞系的实验，这些机制可能是异常癌细胞增殖的基础。ATC 肿瘤通常在 RAS/RAF/MEK 信号级联反应中包含驱动基因改变，这有助于癌细胞的侵袭性增殖，并且 ATC 细胞通常分泌几种生长因子或细胞因子，如 VEGF，为癌症建立合适的微环境进展。因此，索拉非尼可能是治疗 ATC 的可行药物。然而，其在 ATC 中的详细作用机制值得进一步调查。

　　结果表明，与具有RAS突变或同时发生BRAF和PI3KCA突变的细胞系相比，索拉非尼/索拉菲尼在调节具有BRAF突变的ATC 细胞中的细胞增殖方面更有效。已经使用乳腺癌、结肠癌或胰腺癌细胞系以及 ATC 细胞系证明了遗传异常与对细胞活力的影响之间的关系。索拉非尼已被证明可抑制具有野生型BRAF或突变型BRAF或CRAF 的细胞系.然而，在所有这些先前的报告中，需要高剂量的索拉非尼来抑制突变的RAS产生的大量生长信号，RAS是RAF上游的基因。与这些报告一致，据观察，需要 > 500 nM 的索拉非尼来削弱具有RAS突变的 ATC 细胞的活力。Kim等人在他们的研究中使用 5 个已知BRAF突变状态的ATC 细胞系检查了索拉非尼的体外和体内作用。尽管他们报告了 ATC 细胞的凋亡细胞死亡，而与BRAF 无关索拉非尼治疗后的突变状态，他们使用了非常高的浓度（> 5,000 nM）。在这里，证明了低浓度索拉非尼 (50-200 nM) 在索拉非尼敏感、BRAF 突变的 OCUT-4 细胞中诱导细胞周期停滞，这可能是由于对 MEK 磷酸化的抑制。因此，索拉非尼对癌细胞造成损伤的主要机制似乎是通过靶向 RAF 导致细胞周期停滞，而不是诱导细胞凋亡。目前的研究结果表明，携带BRAF突变的ATC 细胞或肿瘤可能是索拉非尼治疗更可行的靶点。

　　在本研究中，证明了 ATC 细胞分泌的体液因子对 HUVEC 增殖的刺激，其被抗 VEGF 阻断剂部分阻断，但被索拉非尼/索拉菲尼更显着抑制。尽管需要进一步研究以确定其他体液因子（如 PDGF）的参与，但这些结果表明索拉非尼的抗肿瘤作用主要是由于来自 ATC 细胞的体液因子（包括 VEGF）刺激的肿瘤血管化受损。

　　总之，本研究表明，与由其上游基因RAS产生的信号相比，索拉非尼/索拉菲尼更有效地抑制了 ATC 细胞中RAF产生的生长信号。ATC细胞通过分泌包括VEGF在内的体液因子来刺激内皮细胞的生长；这种作用被索拉非尼抑制。尽管应确定临床有效联合治疗的合适合作伙伴以提高临床反应，但目前的观察表明索拉非尼具有一定程度的治疗 ATC 的潜力。微信扫描下方二维码了解更多：