第二代EGFR抑制剂靶点为EGFR（包括19Del、L858R常见突变及罕见突变）、HER2及HER4，为不可逆结合。主要有阿法替尼与达克替尼，在Archer 1050研究中，达克替尼vs吉非替尼一线治疗EGFR+的NSCLC患者，两者PFS为14.7m vs 9.2m，OS为达克替尼34.1m vs 吉非替尼26.8m。另外，部分小研究也证实二代TKI用于治疗EGFR不常见突变（G719、S768I、L861I等）也可以获得一定的疗效。
第三代EGFR抑制剂奥希替尼（Osimertinib，AZD9291）是不可逆的TKI，产家为阿斯利康，目前FDA批准用于以下两个适应症：1）治疗既往EGFR-TKI耐药后出现EGFR-T790M突变的转移性晚期NSCLC患者。（基于AURA试验）2）用于一线治疗EGFR突变（（外显子19缺失或外显子21 L858R突变）的转移性非小细胞肺癌（NSCLC）。（基于FLAURA试验）
在AURA3试验中，奥希替尼用于治疗一线EGFR-TKI治疗进展后合并T790M突变的NSCLC，相比于化疗组，奥希替尼的mPFS延长了6.7m（10.1m vs 4.4m）。在基线合并脑转移的患者中，两组的mPFS分别为8.5m和4.2m。
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